在細胞生物學研究中，細胞株的保存與復(fù)蘇是實驗成功的關(guān)鍵步驟之一。二甲基亞砜（DMSO）作為一種常用的冷凍保護劑，在細胞凍存過程中發(fā)揮著重要作用。然而，當從商業(yè)供應(yīng)商處進行細胞株購買時，這些細胞通常被儲存在含有DMSO的冷凍介質(zhì)中。那么在開始培養(yǎng)之前，是否有必要通過離心來去除DMSO呢？

　　一、DMSO的作用與潛在影響

　　DMSO能夠降低冰點，減少細胞內(nèi)冰晶形成，從而保護細胞免受冷凍傷害。但是，高濃度的DMSO對某些類型的細胞可能具有毒性作用，尤其是在復(fù)蘇后的初期階段。此外，DMSO也可能干擾后續(xù)實驗的結(jié)果，比如影響藥物篩選測試或基因表達分析等。

　　二、何時考慮移除DMSO？

　　1.特定類型的細胞：對于一些特別敏感的細胞系，如干細胞或原代細胞，建議在復(fù)蘇后盡快移除DMSO。

　　2.長期培養(yǎng)計劃：如果計劃將細胞長時間維持在培養(yǎng)狀態(tài)而不立即使用，則應(yīng)盡可能早地去除DMSO，以減少其潛在的負面影響。

　　3.后續(xù)實驗需求：根據(jù)即將進行的實驗類型決定是否需要移除DMSO。如在進行流式細胞術(shù)或其他需要高度純凈細胞懸液的技術(shù)前，最好先清除掉殘留的DMSO。

　　三、如何安全有效地移除DMSO？

　　1.溫和離心：將含有細胞的冷凍管置于37℃水浴中快速解凍，然后轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的離心管中，輕輕混勻后以低速（約200-300 g）離心5分鐘。

　　2.洗滌步驟：棄去上清液，加入預(yù)熱至室溫的PBS緩沖液重懸沉淀物，再次離心清洗一次。

　　3.轉(zhuǎn)移至新容器：最后一次離心后，用適量全培養(yǎng)基重新懸浮細胞，并轉(zhuǎn)移到預(yù)先準備好的培養(yǎng)瓶或孔板中繼續(xù)培養(yǎng)。

　　四、注意事項

　　1.整個過程中動作要輕柔，避免劇烈震蕩導(dǎo)致細胞損傷。

　　2.確保所有操作都在無菌條件下完成，以防污染。

　　3.根據(jù)具體情況調(diào)整離心速度和時間，不同種類的細胞對機械應(yīng)力的耐受程度不同。

　　雖然不是所有情況下都必須去除DMSO，但考慮到其可能帶來的不利影響，特別是對于那些對環(huán)境變化較為敏感或者用于特定目的的細胞株來說，采取適當?shù)拇胧﹣頊p少甚至消除DMSO的存在是非常值得推薦的。通過上述方法，我們可以更加靈活地控制實驗條件，提高研究效率和準確性。

上一篇 : 科佰生物春節(jié)放假&發(fā)貨通知    下一篇 :  如何利用STR分析法監(jiān)測細胞株的遺傳穩(wěn)定性？

>> 返回首頁