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原載自：www.diomay.cn[技術(shù)資料頻道] 2016-10-20 瀏覽次數(shù)：1562

　　ATCC細胞的基本原理是通過在支持物（如蓋玻片）上培養(yǎng)貼壁細胞，可以應(yīng)用抗體檢測細胞表面抗原的表達或進行酶細胞化學(xué)以及免疫細胞化學(xué)檢測。該方法的優(yōu)點是細胞貼壁牢固，能夠維持細胞生長時的狀態(tài)。

　　ATCC細胞培養(yǎng)方法操作步驟：

　　1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

　　2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

　　3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

　　4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

　　5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁ATCC細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。

　　ATCC細胞實驗要點及說明：

　　1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

　　2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

　　3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

　　4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

　　5．如果ATCC細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。